(1) 培养基的配制
① PDA 培养基: 分离蛹虫草菌种用。
② 分离用培养基: 土壤浸出液100毫升, 琼脂15克, 加水至
1000毫升, 煮沸。
③ 蛹虫草分离培养基: 硫酸镁0.3 克, 磷酸二氢钾 1.5 克,
氯化钾0.5克, 硫酸铁0.01克, 天门冬酰胺1克, 硝酸钠0.5克,
蔗糖30克, 琼脂18克, 加水至1000毫升。
108各 论
④ 米饭培养基: 生大米50克, 磷酸二氢钾0.5克, 葡萄糖10
克, 维生素 B10.5克, 水50毫升。
(2) 菌种分离 一般采用组织分离, 选择生长健壮、 无虫病的
蛹虫草子实体、 菌核作为分离材料。 在无菌条件下, 切取蛹虫草顶
端子实体 部 分, 0.2~0.4 厘 米, 将 组 织 表 面 用 清 水 洗 净, 再 用
0.1%升汞消毒处理1~2分钟, 然后用无菌水浸洗, 接种于培养基
上, 在22℃温箱中培养, 待培养基表面长满白色绒毛状菌丝, 经
筛选、 提纯获得纯蛹虫草菌种。
(3) 菌种制作
① 母种制备: 用组织分离接种后长出的菌丝为母种, 再转继
代培养。
② 原种、 栽培种制作: 将大米用水浸泡24小时, 捞出后蒸半
小时, 装入瓶中, 高压灭菌后, 将母种挑取少许接于米饭培养基
中, 放在22℃条件下培养, 经20天左右, 菌丝长满瓶即可。 栽培
种是将原种再扩大培养。