可溶性抗原与相应抗体结合, 在有电解质存在时可形成肉眼可
46 现代鸡病防制实战技术问答见的白色沉淀线 (或物), 该过程称为沉淀反应。 参与沉淀反应的
抗原称为沉淀原, 抗体称为沉淀素。 沉淀反应可分为固相和液相,
液相沉淀反应中以环状沉淀反应多见; 固相沉淀反应中主要有琼脂
扩散试验、 对流免疫电泳试验。
以下介绍在鸡病中常用的琼脂扩散试验方法。
所谓琼脂扩散反应, 即将抗原和抗体在含有电解质的琼脂凝
胶中扩散相 遇, 引 起 抗 原 抗 体 结 合 形 成 肉 眼 可 见 的 沉 淀 线 的 现
象。 琼脂为一种含硫酸基的多糖体, 高温时能溶于水, 冷后凝固
形成凝胶, 该凝胶呈多孔结构, 孔内充满水分, 其孔径大小取决
于琼脂浓度, 如1%的琼脂凝胶的孔径为85 微米, 因此允许各
种抗原或抗体在琼脂 凝 胶 中 自 由 扩 散, 当 按 一 定 比 例 加 入 的 抗
原和抗体相遇时, 就会 形 成 一 条 明 显 的 沉 淀 线, 而 且 一 对 抗 原
和抗体只能形成 一 条 沉 淀 线 (图 1-89) 。 故 该 法 常 用 来 鉴 定 抗
原、 抗体及其效价。 如 用 于 传 染 性 法 氏 囊 病、 脑 脊 髓 炎、 鸡 白
痢的检查。
图1-89 当抗原和抗体向四周凝胶中扩散,
在两孔间可出现1~2条沉淀线
方法: 将清洁平皿 (直径9~10厘米) 置于水平台上, 倒入加
热融化的1%缓冲琼脂15~20毫升, 厚度2.5~3毫米, 注意勿倒
出气泡, 待冷凝后将琼脂平皿放置于事先画好的带中央孔的六角形
图案的纸上, 用金属打孔器按图形位置打孔, 再用针头或小镊子将
孔内琼脂块挑出, 外周孔直径为6毫米, 中央孔为4毫米, 孔距为
3毫米; 中间孔滴加标准抗原, 周围孔滴加待检血清和阳性对照血
第一章 鸡病诊断基础与方法 47图1-90 结果判定
清, 加完样品后, 将平皿置湿盒内, 放室温 (15~30℃) 下观察
2~3天。 结果判定 (图1-90): 标准阳性对照血清与抗原孔之间形
成沉淀带, 或干扰其毗邻的阳性血清沉淀带使其邻端向内侧偏弯
者, 判为阳性; 与抗原孔之间不出现沉淀带, 阳性血清相邻近的沉
淀线仍为直线向外偏弯者, 判为阴性。