对于生物氧化过程中的细菌, 使用时需要知道菌液中所含的细菌数量。 测定和计量细
菌的数量一般有以下几种方法:
(1) 比浊法。 其原理是因为菌体不透光, 利用菌液所含细菌浓度不同, 液体的浑浊
度则不同, 然后利用分光光度计测定菌液的光密度。 用测得的光密度和标准曲线对比, 即
可得知菌液的密度。
(2) 直接计数法。 该方法是利用血球计数器 (Hemocytometer), 直接在显微镜下观察
计数所取菌液样品中的细菌数量。
(3) 平皿计数法。 该方法是将所要测定的菌液取出后, 稀释成一定的倍数, 用固体
培养基制成平板, 然后在一定的温度下进行培养, 使其长成菌落 (Colony
formation
unit,
CFU), 计算出菌落数, 再乘以稀释倍数, 则得到所测菌液的活菌浓度。
(4) 液体稀释法。 该方法是将菌液按连续的 10 倍系列在培养基中稀释成不同的浓
度, 然后进行培养。 经培养后, 记录每个稀释度出现生长的试管数, 然后查最大可能数表
(Most
probable
number, MPN, 见有关微生物实验教材), 根据样品的稀释倍数就可计算出
其中活菌的含量。
(5) 细胞干重测定法。 该方法是将菌液离心或过滤后, 洗涤除去培养基成分后, 转
第二节 生物细菌及工业应用 ·207·移到合适的容器中, 置 100 ~ 105℃ 干燥箱烘干或低温 (60 ~ 80℃) 低压干燥至恒重后称
重。 一般细胞干重为细胞湿重的 10% ~20% , 对于细菌, 一个细胞重约 10 -12 ~10 -13
g。
目前, 采用较多的微生物生长测定方法是比浊法、 直接计数法和液体稀释法, 这三种
方法均为直接计数方法。 此外, 也有采用蛋白质分析方法来估测细菌的数量。