研究任何微生物的形态学和生理学特性必须进行微生物的纯
粹培养有一个细胞所形成的菌落 指固体培养就是纯粹培养
一般都是采用科赫的方法获得纯粹培养的操作过程如下
取几支盛有熔融的胶基或其他熔融的固体培养基的试管
将其中的一支试管用左手的大拇指和食指拿住使试管几乎呈水
平位置这样就可避免空气中的孢子落到试管中
然后拔出棉花塞子以右手的手指夹住使得塞在试管内
的部分不至于接触到手稍以火烧试管管口并以烧过的铂丝将接
种的材料接种到试管内此后以火烧试管口并用棉花塞塞住
再将接种后的熔融胶基小心地混合混合的方法将试管
向一端徐徐倾斜然后再将另一端倾斜 倾斜时注意不要使胶基接
触到棉花塞并将试管置于两手掌之间搓转
再取第二支盛有熔融胶基的试管以烧过的小铂耳由第一
支试管中取(滴胶液接种到第二支试管中
胶基混合后又以同样方法进行第二次移种由第二支试管中取
((滴胶液移植到第三支盛有培养基的试管内
若原来的接种材料所含的细胞非常丰富那么也可以进行
第四次或第五次移种
(这样得到稀释了许多次的接种材料之后便可以准备倒
出首先取掉棉花塞再以火烧试管口然后把胶基倒入灭菌过的
培养皿中并使得胶基均匀地分布在皿底其他各试管亦以同样方
法倒入另外的灭菌过的培养皿中将所有培养皿置于(5的
定温箱内
从接种材料带入胶基中的每一个细胞 芽孢也是这样当凝
固时便固着在一定的地方在固体培养基中它失去了活动的能
力便开始在固定的地方发育而形成菌落
问题在于利用怎样的稀释方法将这些菌落分离以解决一个菌
种的平面培养有时这种分离在第一次稀释中即可获得而有时则
需要在第四次甚至在第五次才可获得
在显微镜下观察菌落 取菌落中的细胞制成标本当确定是
相同的细胞后将菌落移种到试管的琼脂斜面上并要严格防止其
他菌侵入
在固体培养基上可应用划线和穿刺两种接种方法划线接种法
是在试管内凝固的琼脂斜面的表面上进行的 琼脂培养基占试管容
积的-而穿刺培养法是将带有接种材料的接种针插入试管内
的固体培养基中
为了更正确再将这些似乎完全是纯粹培养的菌落培养到培养
皿中进一步在显微镜下验证所培养的菌落是相同的方可证实其
为纯粹培养
当菌落移种在琼脂培养基内并倒入培养皿时动作几乎完全
相似只是要求所有的动作应求迅速可靠因为琼脂培养基极易
凝固