生产种也称作三级菌种, 一般用玻璃广口瓶或塑料袋生产。 生
产种的接种过程, 操作者也应严格遵照无菌操作程序进行, 培养基
瓶 (袋) 高压灭菌待冷却后, 即可移入接种间。 选择无杂菌污染、
菌丝已长满菌种瓶的原种, 用酒精擦拭瓶壁和瓶口外, 揭去牛皮
纸、 棉花塞瓶外部分在火焰上燎烧, 杀死可能沾染的杂菌, 然后拨
去棉塞, 点燃酒精棉球燎烧瓶口内壁, 将菌种瓶固定到接种架上,
用火焰封瓶口。 如果发现原种棉塞潮湿怀疑感染有霉菌, 虽未发现
培养基和瓶内壁有杂菌菌落, 也应弃去不用。 如原种缺乏仍需用其
扩大接种时, 则应用纸包好棉塞和瓶口, 点燃酒精棉球擦拭和燎烧
瓶壁与瓶底, 用铁器击穿瓶底, 然后固定于接种架上, 接种时只用
瓶底三分之二的原种, 瓶口部的三分之一弃之。 如果原种未长满菌
种瓶, 为争取时间也可用长满半瓶的原种。 接种完毕要留一薄层菌
种, 然后用酒精擦拭瓶口内壁和外壁, 棉塞燎烧后盖好菌种瓶, 包
牛皮纸后移入培养室。 由于半瓶原种菌种瓶内空气较多, 原种很快
会长满, 又可用作原种转接。 接种时左手拿原种瓶, 右手揭去封口
纸和棉塞, 并用在火焰上灭过菌的接种铲先将菌种表面老化的菌皮
或已分化出的子实体原基去掉, 然后摇动原种使其松动后并分成小
块, 迅速铲出一小块原种接入待接瓶内培养基中间, 稍压实, 不宜
使菌种太粉碎。 火焰燎烧瓶口和棉塞后盖住瓶口, 包好封口纸。 用
77名贵药用真菌栽培技术问答
塑料袋生产三级菌种, 袋不能直立、 不宜火燎, 接种较困难, 除接
种室应严格灭菌外, 接种后可将培养袋口下部在石灰浆中浸泡片
刻, 起到密封作用, 接种后竖放在培养架上, 不宜挤压和翻动。
生产种接种工作最好两个人配合进行, 助手协助揭去培养基瓶
的封口纸, 并微松动棉塞, 接种后协助盖紧棉塞、 包好封口纸, 可
提高接种效率。