菌种污染会延误生产季节, 加大生产成本, 是药用真菌生产成
败的关键问题。 从母种、 原种到生产种的三级菌种生产过程, 每一
个环节处理不当, 都会造成污染。 因此, 首先应从思想上重视菌种
污染问题, 建立无菌操作的概念。 工作中必须严格遵守无菌操作规
79名贵药用真菌栽培技术问答
程, 才能减少污染, 降低污染率。 在菌种生产过程中, 应掌握好以
下几个环节。
(1) 严格选择菌种 如果发现和怀疑母种、 原种污染, 决不能
转接到下一级菌种培养基上, 如果棉塞吸潮生霉, 也不能用作菌种
转接, 霉菌的孢子轻微振动就会落在培养基或菌种上, 一旦条件适
合, 会很快蔓延, 严格选择菌种, 是防止污染的关键。
(2) 培养基灭菌要彻底 菌种不同培养基灭菌时间和压力、 温
度的要求也不同。 严格掌握灭菌程序, 时间过长会破坏培养基营养
成分; 灭菌时间不足, 压力和温度未达到要求, 灭菌不彻底, 都会
引起污染, 尤其是常压灭菌, 因时间较长, 温度易忽高忽低, 是生
产中常见引起污染的原因。 如果发现一批菌种污染, 或培养过程中
瓶口上部目的菌种生长很好, 而瓶底下层开始生霉菌, 这都是灭菌
不彻底所致。 此外, 高压灭菌锅与接种应尽量在相邻或在连接的一
栋房子里, 保持清洁的环境, 使培养基冷却过程尽量少暴露在露天
里。 斜面菌种灭菌后, 最好置于25℃恒温箱中培养24小时, 取出
后仔细检查培养基中有无杂菌污染, 检查培养基是否灭菌彻底。
(3) 接种过程要严密 首先是接种间一定应保持灭菌彻底, 一
般情况下微生物的营养细胞经紫外线照射15~20分钟、 芽孢经照
射30~40分钟即可杀死。 但微生物是飘动在空气中的, 一些紫外
线照射不到的死角, 如灯管上方及接种桌的下面微生物孢子都易漏
网, 为了灭菌彻底, 在开启紫外灯前先喷75%酒精, 可杀死部分
微生物, 并可使空气中的灰尘被吸附后落地, 被紫外线杀死。 接种
时应严格按照无菌操作规程, 除上述基本要求外, 接种时不能在接
种间走动、 打闹, 不能谈话说笑, 操作技 术 应 熟 练, 动 作 要 稳、
准、 快。
(4) 创造最佳的培养条件 接种后一定要给菌种生长繁殖创造
一个最有利的环境条件, 促进目的菌种生长、 抑制杂菌, 并及时检
查, 发现有污染霉菌的菌种应及时清除, 防止杂菌孢子传播。 目的
菌种生长速度快, 早封瓶口能抑制杂菌生长, 如果让霉菌占了优
势, 要培养的菌种就会明显地受到抑制。